邻 苯 二 甲醛 (OPA)通 过 美 国食 品与 药品 安 全 管理 局 (FDA)认证高水平消毒剂后，在国外 已用于 内镜 的消毒 【1]，国 内近 年来对其十分关注【～ 。为 了解邻苯 二 甲醛 消毒剂 杀灭 芽 孢的能力，我 们选择 了进 口邻 苯二 甲醛 消毒剂和 国产强 化 戊二醛消毒剂进行 比较，采用载体定量杀菌试验，对其实验室 杀灭枯草杆菌黑色变 种芽孢效 果和使 用稳 定性进行 了观 察。 现将结果报告如下 。

1 材 料与方法

1．1 材料

进 口邻苯二甲醛消毒剂(美 国强 生公 司)，邻苯二 甲醛标示含量为 0．50％～0．60％；强化戊 二醛 消毒剂为 医院 内镜 消毒使 用产品，戊二醛标示含量 2．0％-2．2％，

1．2 理化指标检测 消毒剂有效成份含量测 定参照《消毒 技 术规范>[4]邻苯二 甲醛消毒剂采用高效液相色谱 法测 定产品 中正一邻苯 二 甲醛的含量 ；强化戊二醛 消毒剂 采用硫 酸滴定 液 测 定产品中戊二醛含量 ；消毒剂 pH值 测定 采用 PHS-25精 密 数显酸 度计。

1．3 载体制备

取枯 草杆 菌黑 色变种 (ATCC 9372)芽孢 悬 液，用胰酪胨 大豆 (TSB)营 养 肉汤配 制染菌 用菌 悬液。取 试 验 菌悬 液 0．02rnl滴染于无菌不锈钢 圆片上 (直径 15mm，厚

0．5ram)，置 37℃温箱烘干，制成 菌片备用。

1．4 中和剂鉴定试验

按 《消毒技术规范>规 定设 计 6组，以 枯草杆 菌黑 色变种芽孢为 试验菌 ，采用 载体 定量杀菌 试验 程 度进行 [5]。

1．5 载体浸 泡定 量杀 菌试 验 将 含每 个 菌 片 5ml消毒 液 (阳性对照为磷酸盐缓 冲液 )的无菌平皿置于 (20±1)℃恒 温 水浴中，加入 菌片作用 i定时间，取 出菌片，放 入含 5ml中 和剂 的试管 内，用 电动 混合器 震荡 40S，洗脱 钢 片上的 菌，中 和作 用 10rain；取洗 脱液作 活菌计 数，计算杀灭对数值 。所 有 试验重复 3次。

1．6 连续使 用稳定性试验

分 别取双 份 2000ml的邻苯 二 甲醛、强 化戊二醛 消毒剂原液分 别盛装 于 2个无 菌带盖搪 瓷 盘 中，各放入清洁的 医用镊子 、剪 刀、止 血钳等 医疗器械 达 到 满载要求 ，每 Ft将器械取出 ，用 清水洗涤，沥干 ，再浸泡到消毒 液 中。按每个载 体 10ml取 浸泡 当 日、7，14d搪 瓷盘 中的 消 毒液至无 菌平皿，置于 (20±1)℃ 恒温 水浴 5rain，将试 验 菌 片浸没其 中进行 载体定量 杀菌试验。

2 结 果

2．1 理化 指标测定

邻苯二 甲醛消毒剂为单方制剂 ，经测 定 含正一邻苯二 甲醛 0．53％，pH 值 为 7．45；强 化戊 二醛 消毒 剂 是戊二醛和 阳离子表 面活性剂 的复方 制剂 ，经测 定含戊 二醛

2．18％，活化前 pH值 2．55，活化后 pH值 7．74。

2．2 中和 剂鉴定 试验 用含 3g／L卵 磷脂 、3．0％吐温一8O、 1O L甘氨酸 的磷酸 盐缓 冲液 (PBS)作为 中和 剂，可有效 中 和邻 苯二 甲醛消毒剂原液和强化戊二醛 消毒剂 液对试验菌 残留作用，且中和剂溶液及其中和产物对枯草杆菌黑色变种 芽孢 的生长无明显影响。

2．3 对细菌芽胞的杀灭效果 邻苯二甲醛消毒剂原液作用 3h，对不锈钢 片上 枯 草杆 菌黑色 变 种 芽孢 的 杀灭 对数 值 为 3．21，作用 10h杀灭 对数值 >6．10；强 化戊二 醛消毒剂 原 液 作用 0．5h，对 枯 草 杆 菌黑 色 变 种 芽 孢 的 杀灭 对 数值 达 到 3．43，作用 3h的杀灭对 数值 >6．10(表 1)。

2．4 连 续使 用稳 定性试验

邻苯二 甲醛消毒剂原 液连续 浸 泡 医疗器械 7、14d后，作用 3h，对不锈钢片上枯草 杆菌黑 色 变 种芽孢的平均 杀灭对数值 均 >3．00；强 化戊二 醛消毒 剂原 液连续浸泡 医疗器械 7、14d后，作 用 3h，对芽孢 的杀灭对数 值均 >6．o0(表 2)。 表 1 不 同时间 2种消毒剂对枯草杆菌 黑色 变种 芽孢杀灭 效果比较

注 ：阳性对 照组平均菌 数为 1272000cfu／片。结 果为 3次试验 平均值 。

表 2 2种 消毒 剂不 同作 用时 间的平均杀灭对数值

注 ：结果为 3次试验平均值。

3 讨 论

本次试 验结 果表 明，0，53％邻苯 二 甲醛 消毒剂 原液 作用 3h可对芽孢达到 消毒效 果，但 与强 化戊 二醛 的 杀芽 孢效果 有一定差距，与黄育 红报道 基本一 致 【6】。本 次邻 苯二 甲醛消 毒剂 杀灭芽孢 的结果 明显 不如 许能 锋等 报道 【3】的 国内邻 苯 二甲醛 消毒 剂，可能与进 口为单方制剂 ，而 国内邻苯二 甲醛 消

毒剂多与醇类、季铵盐类及乳 化剂等复 配，且 pH值在 8．0以 上有关 ；许能锋等 已证实 ，含表面活性剂的碱性邻苯二 甲醛 杀 芽孢效果最 好 。 由于戊二醛在 内镜 消毒 中逐渐 暴露诸 多 问题 ，且 使用 前 要活化、使用浓度相对高等缺 陷，国 内外学者均提 出用邻苯 二 甲醛消毒剂 替代戊 二醛 用于 内镜 消毒 [2， 。本 次研 究证 明， 邻苯二 甲醛 消毒 剂具备高 水平消毒效果 ，且使 用稳定性好，可 连续使用 14d。 实验 中发现邻 苯二 甲醛 消毒 液接 触皮 肤、衣 物后 会有灰 色反应不易洗去；其产品说明中也标注“消毒后务必正确冲洗 干净 ；可能引起过敏反应 ；与 消毒液接 触可能使裸露 的皮肤或 衣服染 色；应避免与眼睛、皮肤 或衣服接 触”，使用中仍应 引起 注意 。

邻苯二甲醛( Orthophthalaldehyde，OPA) 由于其 刺激性气味小、消毒时间短的优点作为第二代内镜 清洗消毒剂近年来逐渐被广泛应用，现阶段日本邻 苯二甲醛的使用率为 45% ，美国为 41%〔1〕。但由于 其易致敏反应被禁用于膀胱镜消毒，且残留 OPA 会 对患者胃肠黏膜产生损害〔2〕，导致异丙醇休克反 应〔3〕。虽然现有的国内外内镜指南均强调了清洗 步骤对残留消毒剂的清除作用〔4〕，但对于实际内镜 的 OPA 残留量及有效清除方法暂无相关研究报道。 因此，本研究从多水平处理方案验证 OPA 经不同清 洗时间和方法后的残留量，以期为临床规范制定和 应用提供理论依据


材料与方法

1． 1 试验材料 高效液相色谱仪，1200 HPLC( Agilent technologies 公司) ; 漩涡振荡器: SL － A256( Scientific Industries 公司) ; 2，4 － 二硝基苯肼: 含量 99% ( 广州化学 · 2611 · Chinese Journal of Disinfection 2016; 33( 12)试剂厂) ; 乙腈: 色谱纯( MEＲK 公司) ; 邻苯二甲醛: 含量 99% ( SIGMA － ALDＲICH 公司) 。 本研究采用的内镜为 GIF － Q260J( Olympus 公 司) ，0． 55% CIDEX OPA 消毒液( 强生公司) ，一体 化内镜清洗消毒水槽 1 套( 深圳柯丽尔) ，自动喷淋 式内窥镜清洗消毒槽 1 套( 国家实用新型专利: ZL 2013 2 0185558． 2) ，内镜自动清洗消毒机 1 台( 强 生公司) 。

1． 2 试验方法

1． 2． 1 分组方法 试验分为 4 组: 第 1 组为空白对照组，直接使用过滤水清洗后采样; 第 2 组为单股水 流组，采用传统水龙头进行清洗; 第 3 组为喷淋式清 洗组，以流量水泵为依托，在清洗槽槽体各壁均安装 旋转喷淋头，清洗水可从喷淋头集中射出，均匀覆盖冲洗内镜所有外表面; 第 4 组为自动清洗消毒机组， 使用自动清洗消毒机进行清洗。除空白对照组内镜 不浸泡 OPA 外，实验组内镜均先浸泡 OPA 5 min。 每组各 12 条内镜，清洗时间分为 1、2、3、4 min 共 4 个水平。控制进水管压力，每组方法清洗水量均为 10 L /min。

1． 2． 2 采样方法 清洗后的内镜用高压气枪吹干， 将纯化水浸泡插入部外表面 5 min 后收集; 使用高 效液相色谱仪分析残留 OPA 浓度。分别作用 1、2、 3、4 min。

1． 2． 3 高效液相色谱法 色谱分析 C18色谱柱( 可 选用 Lunna － C18 柱，150mm × 4． 6mm，5 ( m) ，流动 相: 乙 腈: 水 = 50: 50 ( v /v ) ，柱 温: 25℃，流 速: 1 ml /min，检测波长: 220 nm，进样体积: 20 μl。

1． 3

统计方法

数据以 x珋± s 表示，采用 SPSS 13． 0 统计软件对 数据进行分析，用多因素析因设计方差分析对处理 方法和处理时间作统计分析，对同一组间不同水平 的 OPA 残留量采用 LSD 法进行比较，P ＜ 0． 05 表示 差异有统计学意义。 2 结果 应用析因设计资料方差分析不同清洗方法及处 理时间后 OPA 残留量间差异，均存在统计学差异， 需采用 LSD 进行多重比较。 2． 1 不同清洗方法 OPA 残留量的 LSD 多重比较 自动清洗消毒机组 OPA 残留量最低，与空白对 照组间无统计学差异，清除效果最佳。单股水流组 的 OPA 残留量最高，与各组间均存在显著性差异。 喷淋式清洗组与自动清洗消毒机组间戊二醛残留量 虽无统计学差异，但均值比较喷淋式清洗组较自动 清洗消毒机组和空白对照组均高( 表 1) 。 表 1 不同清洗方法对内镜外表面 OPA 残留量影响的比较 处理方法 ( I) 处理方法 ( J) MD ( I － J) SE P 95% 置信区间 下限 上限 空白对照 单股水流 -0． 597* 0． 085 0． 000 -0． 770 -0． 423 喷淋 -0． 265* 0． 085 0． 004 -0． 438 -0． 092 自动洗消机 -0． 127 0． 085 0．144 -0． 301 0． 046

单股水流 空白对照 0． 597* 0． 085 0． 000 0． 423 0． 770 喷淋 0． 332* 0． 085 0． 000 0． 159 0． 505 自动洗消机 0． 469* 0． 085 0． 000 0． 296 0． 643

喷淋 空白对照 0． 265* 0． 085 0． 004 0． 092 0． 438

单股水流 -0． 332* 0． 085 0． 000 -0． 505 -0． 159

自动洗消机 0． 137 0． 085 0． 116 -0． 036 0． 311

自动洗消机 空白对照 0． 127 0． 085 0． 144 -0． 046 0． 301

单股水流 -0． 469* 0． 085 0． 000 -0． 643 -0． 296

喷淋 -0． 137 0． 085 0． 116 -0． 311 0． 036

注: 基于观测到的均值。* : 均值差值在 0． 05 级别上较显著。

2． 2

不同清洗时间 OPA 残留量的 LSD 多重比较 清洗时间为 1 min 时，OPA 的残留量与其他时 间点具有显著性差异，2 min 与 3 min、4 min 时间组 间无显著性差异。处理时间达 2 min 后对 OPA 的 残留量清除效果无变化( 表 2) 。 表 2 不同清洗时间对内镜外表面 OPA 残留量影响的比较 处理 时间( min) ( I) 处理 时间( min) ( J) MD ( I － J) SE P 95% 置信区间 下限 上限 1 2 0． 300* 0． 085 0． 001 0． 126 0． 473 3 0． 306* 0． 085 0． 001 0． 133 0． 479 4 0． 258* 0． 085 0． 005 0． 085 0． 431 2 1 － 0． 300* 0． 085 0． 001 － 0． 473 － 0． 126 3 0． 006 0． 085 0． 941 － 0． 167 0． 180 4 － 0． 042 0． 085 0． 628 － 0． 215 0． 132 3 1 － 0． 306* 0． 0850． 001 － 0． 479 － 0． 133 2 － 0． 006 0． 085 0． 941 － 0． 180 0． 167 4 － 0． 048 0． 085 0． 576 － 0． 221 0． 125 4 1 － 0． 258* 0． 085 0． 005 － 0．431 － 0． 085 2 0． 042 0． 085 0． 628 － 0． 132 0． 215 3 0． 048 0． 085 0． 576 － 0． 125 0． 221 注: 基于观测到的均值。* : 均值差值在 0． 05 级别上较显著。

3 讨论

我国现有的内镜机构多使用自动灌流器( 或压 力水枪) 对内镜管腔进行冲洗，以其产生的液体冲 刷力达到漂洗效果。但是内镜外表面的冲洗仍多使 用传统的水龙头冲洗方法，该方法存在水流分布不 均匀与压力限制问题，易导致消毒液在内镜外表面 残留量高。改进内镜清洗方法，减少 OPA 残留量是 临床工作中引起关注的问题。本研究结果显示，自 动清洗消毒机组 OPA 残留量最低，喷淋式清洗槽次 之，单股水流最高，说明喷淋式清洗槽和自动清洗消 毒机可更有效的清除 OPA 残留，原因可能与两者均 采用全方位压力喷洒原理进行冲洗，其冲刷力和水 流的均匀分布对 OPA 清除更为有效。其中喷淋式 清洗槽由于成本远低于自动清洗消毒机，符合我国 临床实际需求，值得推广应用。

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中国消毒学杂志 2016 年第 33 卷第 12 期合理设置清洗时间，提高清洗效率内镜表面残留 OPA 与清洗流程时长呈负相关。本研究结果显示，当 清洗时间达 2 min( 量 = 20 L) 时，OPA 残留量趋于 稳定。可能与 NormanMiner 等〔5〕报道的 OPA 能被内

镜管腔自身的聚合材料吸收而持续存在有关。因此， 临床实践进行内镜清洗时，并非清洗时间越长对 OPA 的清除效果越好。参考本研究结果，合理设置内镜清 洗步骤时间，既可有效去除 OPA 在内镜表面的残留， 又可提高清洗效率，从而提高内镜周转率。 和传统消毒剂戊二醛相比，OPA 使用浓度有所 降低，但直接接触仍会引起眼睛、皮肤和粘膜的损 伤〔

6〕。我国现有清洗消毒规范对内镜等器械消毒剂残留量及清洗环节均未有明确规定〔

7〕，因此使用 内镜机构对消毒剂相关化学性胃肠炎、过敏反应等 亦缺乏重视。本研究结果证实，不充分的清洗会导 致 OPA 残留量升高，因而规范内镜清洗环节流程、 制定相关标准及规范是提高清洗消毒效果，保障患 者安全的重要保障。

入口近，细菌相对容易进入体内，感染发生率高。导 管动脉端为侧孔开口，应用过程中常因血流不畅致 血栓发生率高〔4〕，处理血栓过程亦又增加了感染机 会。血液透析患者一般每周需进行 2 ～ 3 次，每 2 次 透析至少间隔 24 h 以上，期间留置中心静脉导管可 能被细菌污染，而普通的消毒液在消毒完成后并无 持久的抑菌效果，以致增加感染。置管部位和留置 时间是影响导管感染的主要因素，股静脉置管较颈 部更容易感染。导管感染率也随留置时间延长而呈 直线性上升〔5〕。 葡萄糖酸氯己定是氯己定的葡萄糖酸盐，属于 阳离子表面活性剂和常用皮肤黏膜消毒剂，主要是 破坏细菌胞膜上的渗透屏障，低浓度可导致细菌部 分胞浆渗漏，高浓度则可致胞浆凝聚变性，从而达到 杀灭细菌的作用〔6〕。乙醇不仅能促进葡萄糖酸氯 己定杀菌作用，起到协同增效作用，能快速杀灭细菌 繁殖体及分枝杆菌、真菌孢子、亲脂病毒，并具有速 效、速干的特点，还具有持续抑菌的效果〔7〕。 大量研究表明，股静脉留置导管的感染发生率高 于颈内静脉〔8〕。本研究结果显示，使用葡萄糖酸氯己 定醇进行消毒，股静脉组与颈内静脉组患者感染率并无显著统计学意义，而使用碘伏消毒液的两组患者的

感染发生率则有显著统计学意义。此现象可能是由于 葡萄糖酸氯己定醇更有利于局部保持持久抑菌有关。 有文献报道，随着置管时间的延长，感染的发生 率也随之升高9〕，本研究结果也支持这种观点。但 置管时间大于 2 周时，实验组的感染发生率明显低 于对照组，提示葡萄糖酸氯己定醇能有效降低血液 透析患者因长时间留置中心静脉导管所导致的导管 相关感染的发生。因此，葡萄糖酸氯己定醇与碘伏 比较，用于中心静脉血管留置消毒效果更确切，且具 有良好的长效抑菌能力，能有效降低血液透析患者 中心静脉导管感染的发生率，值得临床推广和应用。

[摘要] 目的 研究分析多酶清洗剂在供应室的应用效果观察。方法 选取2016年2月～2016年6月陕西省第二人民医院供应室回收待处理医疗器械200件为研究对象，随机分为对照组和实验组，每组100件。对照组进行传统清洗剂进行清洗，1/200配置清洗液，实验组利用多酶清洗剂进行清洗，1/200配置，水温25℃～30℃，将器械轴节打开，取出内套针，浸泡于溶液中。比较分析实验组与对照组器械目测检查合格率及杰力试纸检测合格率。结果 经过对应的清洗方式后，实验组目测检查不合格件数为2件，合格件数为98件，合格率为
98.0%。对照组目测检查不合格件数为21件，合格件数为79件，合格率为79.0%，对照组目测检查合格率为79.0%显著低于实验组合格率为98.0%。杰力试纸检测检查中，实验组合格件数为97件，不合格件数为3件，合格率为97.0%。对照组合格件数为75件，不合格件数为25 件，合格率为75.0%，2组差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 多酶清洗剂在供应室的应用效果理想，应用多酶清洗剂进行清洗，可显著提高清洗质量，操作方便，具有临床推广的意义。

改进多酶清洗剂的清洗方法，提高口腔清洗器械的清洗质量方法将严重污染的2 970件拔牙器械分试验组和对照组各1 485件，再将其各分为3组，每组495件，分别在污染后0 h、1 h、2 h清洗，试验组用1：1多酶清洗剂用超声波清洗机加温至25 ℃、40℃清洗5 mino对照组用1：1多酶清洗剂浸泡30 mino分别取出两组拔牙器械，用流动水冲净。用匹拉米洞残留隐血检测法进行检测，比较每组的清洁效果。结果污染后立即清洗的试验组和对照组清洁合格率均为1％。污染后1 h清洗的试验组清洁合格率99· 6％，对照组清洁合格率97· 0％，二者比较有显著差异（P < 0· 01）。污染后2 h清洗的试验组清洁合格率99· 0％，对照组清洁合格率
1％，二者比较有显著差异（P < 0· 01）。结论对污染严重的拔牙器械，用多酶清洗剂加热钅25 ℃、40 ℃超声波清洗，效果比较显著。

多酶清洗剂
 

多酶清洗剂对器械的清洗质量好，也是基于酶的存在，如蛋白酶快速分解蛋白类污渍，脂肪酶快速分解油脂类污渍，糖酶快速分解碳水化合物类污渍。

探讨多酶清洗剂对成批器械清洗效果。方法  将各类污染的医疗器械随机分为实验组和对照组，对照组使用传统的清洗剂清洗，实验组使用多酶清洗剂清洗。结果 多酶清洗成批器械检测合格率为 99. 07% ; 含氯消毒剂清洗成批器械检测合格率为69. 68%。结论  使用多酶清洗剂清洗成批器械后无任何残留物质，外观光洁且无毒尤腐蚀性、省事省力。