1 材 料 与方 法

1．1 试 剂与 载体 1．1．1 试剂 ：①消毒液 ：0．5 邻苯二 甲醛消毒液 (pH 7．40)；② 试 验 菌 ：枯 草 杆 菌 黑 色 变 种 芽 孢 (ATCC9372，军事 医学 科学 院 消毒检 测 中心 )；③ 有 机 干扰 物 ：胰 蛋 白胨 大豆 肉汤 培养 基 (TSB，北京 陆桥 )。 1．1．2 载体 ：不锈 钢 片 、止 血钳 齿部 。

1．2 方 法 依据 《消 毒 技 术 规 范 (2002版 )》(以 下 简 称《规范》)，采用载体定量杀菌试验及模拟现场试 验 进 行 消毒 效果 评价 。 1．2．1 菌悬 液 与 染 菌 载 体 制 备 ：取 枯 草 杆 菌 黑 色 变 种 芽 孢 菌 种 ，进 行 纯 化 分 离 和 增 菌 培 养 ；选 取 单 个 典 型菌 落 ，接 种 营 养 肉汤 作 增 菌 培 养 ，将 培 养 物 接 种 于 罗 氏瓶 中营养 琼脂 培 养 基 表 面培 养 ，洗 净 后 制 成 芽孢 悬 液 ；取 试验 浓 度 细 菌芽 孢 悬液 1O L滴染 于 灭 菌 的 不锈 钢片 和止 血钳 齿部 ，自然干 燥 ，备 用 。 1．2．2 中和 剂载 体 定 量 鉴 定试 验 ：以枯 草 杆 菌 黑 色 变种芽孢菌种作为试验菌 ，设 6组试验 ，按载体定量 杀 菌试 验 程 序 进 行 。结 果 判 定 ，第 1组 无 试 验 菌 ，或 仅 有 少量试 验 菌 生 长 ；第 2组 试 验 菌 量 明 显 多 于 第 1 组 ，但 明显少于第 3、4、5组 ；第 3、4、5组组间菌落数误 差 率应 ≤ 15 ；第 6组 (阴性 对 照 )无 试 验 菌 ，表 明所 选 中和剂及 其 浓度适 宜 ，试验 重 复 3次 。 1．2．3 载体定量杀菌试验 ：按 5mL／片以邻苯二 甲醛 浸泡染菌不锈钢片 ，作用至规定 时间后，将不锈钢 片 移人含 5mL中和剂溶液的试管中，中和作用 10min。 经充分振荡洗脱菌片上 的芽孢 ，作活菌计 数，计算杀 灭对数值(菌落数的对数值)，以胰蛋 白胨生理盐水溶 液 作为 阳性 对 照 ，每 组 试 验 重 复 3次 。依 据 《规 范 》， 对 不锈 钢片 上 污 染 的 枯 草 杆 菌 黑 色 变 种 芽 孢 杀 灭 对 数值>3．00，判定为实验室杀菌合格。 1．2．4 医疗 器 械消毒 模 拟现 场试 验 ：按 10mI／件 以 邻苯二 甲醛浸泡染菌止血钳齿部 ，作用至规定 时间 ， 将载体移入含 10mI中和剂溶液的试管 中，中和作用 10min。经 充分 振 荡 洗脱 作 活 菌 计 数 ，计 算 杀 灭 对 数 值。取 3O件样本进 行试验 ，以无 菌蒸馏水为 阳性对 照。依据 《规 范 》，以 3O件 样 本 的杀 灭对 数值 均 > 3．O0判 定 为 医疗 器 械 消毒模 拟试 验合 格 。

2 结 果

2．1 中和 剂 鉴 定 试 验 结 果 实 验 结 果 显 示 ，以 含 10g／L卵磷 脂 、10g／L吐温一8O的胰 蛋 白胨 大 豆 肉汤 (TSB)作为中和剂 ，可有效 中和邻苯二 甲醛消毒液对 试验菌的残 留作用 ，该 中和剂及其 中和产物对枯草杆 菌 黑 色变种 芽 孢及 培养 基无 明显 影 响 ，见 表 l。 2．2 载体 定 量 杀 菌试 验 结果 试 验 结 果 表 明 ，以邻苯二甲醛消毒液作用 6h，对载体不锈钢片上污染 的 枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值均>3．00。

2．3 医疗 器械 消毒 模 拟现 场 试 验 结 果 以止 血 钳 齿 部为载体 ，邻苯二 甲醛消毒液作用 5h，对载体上污染 的枯草杆菌黑色变种芽孢平均杀灭对数值为 2．44；作 用 6h，平均杀灭对数值为 2．94；作用 7h，杀灭对数值 均 >3．00。

3 讨 论 邻苯二 甲醛消毒液是一种广谱的消毒剂，具有低腐 蚀、无刺激性、可延长作用时间的优点，可杀灭枯草杆菌 黑色变种芽孢，消毒效果好，其杀菌效果可达到戊二醛 消毒液相同的作用效果，对分支杆菌作用优于戊二醛消 毒液，目前应用于医疗器械浸泡消毒及全 自动内镜清洗 机 。其剂 型多样 ，有单 方 、复方 ，杀 菌 效果 差 异大 ，广 泛 应用 于医疗器械 的消毒还有 待于进一步 探索 。 本试验显示 ，以邻苯二 甲醛 消毒液 (0．5 )作用 6h，对 染 于不锈 钢 片上枯 草 杆菌 黑色 变种 芽孢 杀 灭对 数值>3．00；作用 7h，对染 于止血钳齿部枯草杆菌黑 色变 种芽 孢 杀 灭 对 数值 > 3．00。与 袁 国 刚 等 报 道 相 比Ⅲ2]，作 用 效果 较 差 ，可 能 与 消 毒 液 的 浓 度 、pH 等 因 素有关。另 外，单 因子 化学 消毒剂 消毒效 果通 常较 差，复配消毒剂可以提高消毒效果，已成为近年来 消 毒剂研 究 的一个 新 方 向 ，有待 于进 一 步研 究 。

参考文献 [1] 杨永艳 ，周永林 ．拉萨市医疗机构消毒质量 监测结果分析 FJ]．江 苏预防医学 ，2014，25(4)：68． [2] 袁 国刚 ，王长德 ，陈金龙 ，等 ．五种邻苯二甲醛消毒剂 产品对枯 草 杆菌黑色变种芽孢杀灭效果的 比较 [J]．中国消毒学 杂志 ，2014， 3l(9)：918．