近年来，因邻苯二甲醛具有轻嗅味、毒性较低、 pH 值适应范围广等特点，在内镜的处理中应用较为

广泛，其评价结果以实验室杀菌效果为多见〔1 － 3〕，对内镜的消毒处理结果判定，以镜体内腔残留菌落总数、铜绿假单胞菌等致病菌为指标菌为多见〔4 － 7〕。 为观察邻苯二甲醛消毒液对内镜的模拟现场消毒效果，我们在实验室进行了模拟现场消毒试验，同时进行了连续使用稳定性观察。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

邻苯二甲醛消毒液，为杭州某公司生产，经测试原液邻苯二甲醛含量为5 880 mg /L，pH 值为 7. 09。 产品经测试对不锈钢、铝、铜基本无腐蚀性、对碳钢具轻度腐蚀性，加速试验表明稳定性可达两年。对不锈钢载体上的枯草杆菌黑色变种芽孢作用 7. 0 h，杀灭对数值均大于 5. 00; 对染于医用止血钳载体上的枯草杆菌黑色变种芽胞作用 14. 0 h，杀灭对数值均大于 4. 00，处理后残留菌数均 ＜ 10 cfu /件。毒理学测试显示，该消毒液属实际无毒类，微核试验阴性。

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Chinese Journal of Disinfection 2014; 31( 6)实验用内镜清洗消毒机为 DSD － 201 全自动内

镜洗消机，美国明泰科公司出产。模拟用内镜管道为聚四氟乙烯管( 外径 12 mm，内径 6 mm，长度1 000 mm) ，模拟现场杀菌试验用载体为聚四氟乙烯管( 外径 6 mm，内径 4 mm，长度 4 cm) 经脱脂处理，压力蒸汽灭菌后备用。

试验指标菌为枯草杆菌黑色变种( ATCC 9372)芽孢，为中国微生物菌种保藏管理委员会提供，并由本实验室培养制备细菌芽孢悬液供实验用，菌悬液芽孢菌数达到 1 × 108 ～ 5 × 108 cfu /ml。试验用中和剂，经本实验室鉴定合格，组分为50 g /L 吐温 － 80、20 g /L 甘氨酸的胰蛋白胨生理盐水( TPS) 。

1. 2

试验方法

1. 2. 1 染菌载体制备 取 0. 02 ml 芽孢悬液滴染于载体内壁，涂抹均匀，置 54℃ 培养箱中干燥约30 min，制成染菌载体备用。
2. 1. 2. 2

内镜清洗消毒与检测方法

参照卫生部2003 年版《内镜清洗消毒机消毒效果检验技术规范》的要求进行检测，按照规范的清洗消毒机程序和手工清洗消毒操作程序进行，以胃镜为处理对象。① 清洗消毒机清洗程序: 对内镜进行模拟现场消毒试验和连续使用稳定性试验。在模拟内镜管道50 mm、500 mm 和 950 mm 处剪开，布放染菌载体a、b、c 于剪开处，将模拟内镜管道装于清洗消毒机内规定的位置，按使用说明书规定的消毒程序进行处理，设定的程序详见表 1。 分 别 用 浓 度 为5 880 mg /L和3 000 mg /L 邻苯二甲醛消毒作2 组试验。消毒处理完毕后，用无菌镊子将染菌载体取出，

分别置于含有 10 ml 中和剂溶液的试管内，充分洗脱后，以倾注法作残留菌回收计数。同时以室温下放置的染菌载体作阳性对照组活菌计数，以试验同批次的中和剂、稀释液等设阴性对照。试验重复 9次。连续使用稳定性试验是将邻苯二甲醛与 DSD－ 201 全自动内镜洗消机配套使用，消毒处理胃镜，所设定的消毒程序同表 1，并逐条记录处理的内镜数量。在连续使用第 7、14 d 采集消毒液测试邻苯二甲醛含量，然后于第 14 d 进行内镜模拟消毒试验。② 手工操作模拟现场消毒试验: 按照表 2 设定的手工操作清洗消毒程序进行消毒处理。处理完毕后，将载体分别置于含有 10 ml 中和剂的试管内，充分洗脱后，以倾注法作残留菌回收计数。同时以室温下放置的染菌载体作阳性对照计数，以试验同批次的中和剂、稀释液等设阴性对照。试验重复 9 次。

2 结果

2. 1 清洗消毒机模拟试验结果经 9 次重复试验表明，以 5 880 mg /L 和3 000 mg /L 的邻苯二甲醛的消毒液与 DSD － 201 全自动内镜洗消机配套使用，以设定程序作用一个周期 25. 5 min( 消毒液浸泡 5 min) ，对置于模拟内镜中的聚四氟乙烯染菌载体上的枯草杆菌黑色变种芽

孢杀灭对数均值分别为 4. 88、4. 12，处理后残留菌数分别为 ＜ 10 ～ 20 cfu /件和 10 ～ 95 cfu /件，各次试验的 阳 性 对 照 回 收 菌 数 为 7. 20 × 105 ～9. 17 × 105 cfu /件。

用浓度为 5 880 mg /L 邻苯二甲醛的消毒液与该机器配套使用，连续使用 7、14 d 后，邻苯二甲醛含量分别为4 590 mg /L 和3 960 mg /L，使用期间每日处理内镜 4 ～ 10 件、累计 81 件; 以此浓度邻苯二甲醛溶液进行模拟现场杀菌试验的能达到杀菌效果

· 365 ·中国消毒学杂志 2014 年第 31 卷第 6 期要求。

2. 2

手工操作模拟现场消毒试验结果经 9 次重复试验表明，以设定程序作用一周期18. 5 min ( 3 000 mg /L 的邻苯二甲醛的消毒液浸泡5 min) ，对置于模拟内镜中的聚四氟乙烯染菌载体上的枯草杆菌黑色变种芽孢的消除对数值均值4. 65、处理后残留菌数为 20 ～ 175 cfu /件，各次试验

的阳性对照回收菌数为 3. 60 × 106 ～ 4. 23 × 106cfu /件。

3 讨论

邻苯二甲醛在内镜消毒处理的应用报道已较为多见，主要以处理后内镜残留细菌菌落数或致病菌

检测或以实验室检测结果为主，对其在内镜机洗、手洗处理的连续使用有效期、细菌芽孢污染模拟内镜体的处理效果报道尚不多见。本研究结果表明，用浓度5 880 mg /L 的邻苯二甲醛消毒液，按清洗消毒机设定的程序进行处理，对模拟内镜体中的染菌载体上的枯草杆菌黑色变种芽孢的消除对数值均大于4. 0。该浓度邻苯二甲醛消毒液在清洗消毒机按处理程序连续使用 14 d、累计处理 81 件胃镜后，邻苯二甲醛含量从5 880 mg /L 降至3 960 mg /L，但此浓

度对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值仍为 4. 12。用手工操作进行内镜模拟现场试验，3 000 mg /L 邻苯二甲醛消毒液即可满足上述消毒效果要求。本研究发现，对模拟内镜体中的染菌载体上细菌芽孢的消毒效果受染菌后干燥程度、酶洗液的有效浓度、酶洗液及消毒液浸泡时的吹洗频率、水冲洗时的水压和流量影响。染菌载体在 37℃ 条件下干燥时，以同样程序处理后对细菌芽孢的消除效果明显高于染菌载体在 54℃条件下干燥者，此与 54℃条件下干燥时菌液可能出现硬结、与载体结合牢固不易消除有关，或与 37℃条件下干燥时出现芽孢出芽或半出芽现象因而对各种消毒因子的抵抗力明显下降有关，有待于进一步观察研究。手洗处理过程中，模拟内镜体仅在酶洗液、消毒液中浸泡或仅进行3 次以内的吹洗，其对芽孢的消除对数值一般不超过 2. 0( 消除率不高于 99% ) ，此与邻苯二甲醛对芽孢的杀菌效果较弱、需时较长有关3，4〕。基于该现象，邻苯二甲醛在内镜消毒处理的使用过程中，尤其是手洗模式时，需严格按照设定的程序进行处理，尤其需重视酶洗液、消毒液浸泡时的反复吹洗、刷洗步骤，以确保内镜体与酶洗液、消毒液充分接触，去除表面沾染的有机物、微生物，确保消毒效果。

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